Tutkimusoppaat
Tutkimuspeptidien säilytys: lämpötilat ja säilyvyys
Kylmäkuivattuna -20 °C, liuotettuna 2–8 °C, kuljetuksessa huoneenlämpö. Miksi kuiva kakku kestää matkan ja mikä injektiopulloa todella hajottaa.
Peptidipullolla on kolme elinvaihetta, ja jokaisessa pätevät eri säännöt. Kuljetuksen ajan se on kuiva kakku siinä lämpötilassa, joka matkan varrella sattuu vallitsemaan. Pakastimessa se on edelleen sama kuiva kakku. Liuottamisen jälkeen aikaa on paljon vähemmän. Useimmat säilytysvirheet syntyvät siitä, että yhden vaiheen säännöt siirretään toiseen.
Miksi kylmäkuivatut peptidit toimitetaan huoneenlämpöisinä
Kylmäkuivaus eli lyofilisointi poistaa peptidiliuoksesta alipaineessa lähes kaiken veden, ja pullon pohjalle jää valkoinen kakku. Sillä on väliä, koska vesi toimii reagenssina useimmissa peptidiä hajottavissa reaktioissa. Hydrolyysi vaatii vettä. Vettä vaatii myös asparagiini- ja glutamiinitähteiden deamidoituminen, hidas muutos, jonka jälkeen molekyylin massa on sama mutta käyttäytyminen toinen. Kun vesi on poissa, nämä reaktiot pysähtyvät käytännössä kokonaan.
Seuraus on hyvin käytännöllinen: kuiva peptidi ja liuotettu peptidi ovat kaksi eri materiaalia. Liuoksessa huoneenlämpö on ongelma tuntien ja vuorokausien mittakaavassa. Kuivana kakkuna huoneenlämpö kestetään koko kuljetuksen ajan ilman mainittavaa häviötä. Siksi peptidit lähetetään kuivina ja huoneenlämpöisinä eikä kuivajäässä, ja näin tekevät kaikki alan toimittajat. Kylmäketju suojaa materiaalia, joka muuten hajoaisi matkalla. Kylmäkuivattu peptidi ei ole sellaista materiaalia.
Kyse on materiaalin ominaisuudesta eikä oikopolusta. Meillä varastoa säilytetään pakastimessa, ja se lähtee matkaan huoneenlämpöisenä, koska kuiva kakku kestää matkan. Samasta syystä pullo kuuluu saapumisen jälkeen pakastimeen eikä hyllylle: kuljetus on lyhyt, säilytys ei ole.
Mitä tehdä, kun pullo saapuu
Kolme asiaa tässä järjestyksessä. Ensimmäinen jää useimmin tekemättä.
- Anna pullon lämmetä huoneenlämpöiseksi ennen kuin avaat sen, jos se saapui kylmänä talvitoimituksessa. Kun kylmä pullo avataan lämpimässä huoneessa, ilman kosteus tiivistyy kylmälle pinnalle ja vettä pääsee suoraan kakkuun. Näin peptidi kastuu ennen kuin sitä on edes käytetty, ja juuri se on täysin vältettävissä.
- Vertaa kakkua analyysitodistukseen. Sen kuuluu olla valkoista tai luonnonvalkoista kiinteää ainetta. Jos kakku on painunut kalvoksi tai valunut pitkin pullon seinämää, se on jossain vaiheessa ollut lämmin ja kostea. Se ei vielä tarkoita, että aine olisi hajonnut, mutta kuva kannattaa ottaa ennen kuin jatkat.
- Vie liuottamattomat pullot -20 °C:seen valolta suojaan. Näin lukee analyysitodistuksessa ja jokaisella tuotesivulla, ja siellä pullon paikka on liuotuspäivään asti.
Valo, kosteus ja pakastimen valinta
Tumma lasi ja läpinäkymätön rasia ajavat saman asian. Suojattavana on aromaattisten tähteiden eli tryptofaanin, tyrosiinin ja fenyylialaniinin valohapettuminen, joka etenee hitaasti mutta kertyy ja jonka voi välttää kokonaan pitämällä pullon pimeässä. Pahvirasia pakastimessa riittää; monimutkaisempaa ei tarvita.
Kosteus on hankalampi asia, sillä kylmäkuivattu kakku on hygroskooppinen: se imee vettä ilmasta heti kun siihen tulee tilaisuus. Pullo on suljettu alipaineeseen tai suojakaasuun ja tulpattu, joten avaamaton pullo ei ole vaarassa. Riski alkaa siitä hetkestä, kun kumitulppa lävistetään ensimmäisen kerran. Avattua pulloa ei siis pidä kohdella samoin kuin suljettua.
Omasta pakastimesta kannattaa tarkistaa yksi asia. Useimmat kotipakastimet ja monet laboratoriopakastimet ovat huurtumattomia eli automaattisulatteisia: ne lämmittävät tilan säännöllisin väliajoin nollan yläpuolelle jään poistamiseksi ja jäähdyttävät sen taas. Ruoan kannalta se ei näy eikä haittaa. Pullon kannalta se tarkoittaa, ettei sisältöä tosiasiassa pidetä -20 °C:ssa: osan jokaisesta jaksosta se on lämpimämmässä kuin analyysitodistuksen säilytysehto edellyttää. Käsin sulatettava pakastin tai laboratoriolaite, joka pitää -20 °C:n tasaisena, on parempi paikka kaikelle, mitä aiotaan säilyttää kuukausia.
Liuottamisen jälkeen
Bakteriostaattisen veden lisäämisen jälkeen aikataulu muuttuu. Liuotettu materiaali säilytetään 2–8 °C:ssa eli tavallisessa jääkaapissa, ei pakastimessa, ja käytetään kullekin yhdisteelle sopivan ajan kuluessa. Näin lukee analyysitodistuksessa ja jokaisella tuotesivulla, ja juuri sitä ilmoitettu käyttöaika olettaa.
Säilyvyysartikkelissa käydään läpi, mistä tuo aika riippuu ja miksi se vaihtelee yhdisteestä toiseen niin paljon.
Säilytys lyhyesti
| Vaihe | Lämpötila | Huomioita |
|---|---|---|
| Kuljetuksessa, kylmäkuivattuna | Huoneenlämpö | Kestää koko kuljetuksen ajan |
| Säilytyksessä, liuottamattomana | -20 °C | Pimeässä ja suljettuna, mieluiten käsin sulatettavassa pakastimessa |
| Säilytyksessä, liuotettuna | 2–8 °C | Jääkaapissa, ei pakastimessa; käytä yhdisteen käyttöajan sisällä |
| Pitkäaikaissäilytys, liuottamattomana | -20 °C tai kylmempi | Samat olosuhteet; pitkän säilytyksen kestää nimenomaan kuiva kakku |
Toimitus ja säilytys Suomessa ja Pohjoismaissa
Kaksi asiaa koskee erityisesti tätä osaa Euroopasta, eikä kumpikaan muuta edellä sanottua. Ensinnäkin kuljetusmatkat Pohjoismaiden ja EU:n sisällä ovat lyhyitä, joten huoneenlämmössä vietetty osuus pullon elinkaaresta jää päiviin. Toiseksi suomalainen talvitoimitus voi saapua aidosti kylmänä ja kesätoimitus aidosti lämpimänä. Kuiva kakku kestää kummankin, mutta edellä kuvattu kosteuden tiivistyminen on tammikuussa hyvin todellinen ilmiö, kun ulko-oven ja lämmitetyn huoneen välinen lämpötilaero on suuri. Anna pullon tasaantua ennen kuin avaat sen.
Säilytysvaatimukset ovat kaikkialla samat: pakastin, joka pitää -20 °C:n ilman lämpötilan heilahteluita, ja pimeä paikka. Määränpää ei muuta sitä, mitä materiaali tarvitsee.
Usein kysyttyä
- Pitääkö tutkimuspeptidit toimittaa kylmänä?
- Kylmäkuivattuja ei tarvitse. Kuiva kakku säilyy huoneenlämmössä huomattavasti pidempään kuin kuljetus kestää, koska hydrolyysiä ja deamidoitumista ajava vesi on poistettu. Liuoksessa oleva materiaali on aivan eri asia, ja juuri siksi peptidit toimitetaan kuivina.
- Kuinka kauan pullo säilyy huoneenlämmössä?
- Avaamaton kylmäkuivattu pullo kestää huoneenlämmössä viikkoja ilman mainittavaa häviötä, ja juuri se marginaali tekee huoneenlämpöisestä toimituksesta perustellun. Se ei silti ole syy säilyttää pulloa siellä: hajoaminen on hidasta muttei olematonta, ja -20 °C:ssa se on selvästi hitaampaa.
- Riittääkö -20 °C vai tarvitaanko -80 °C?
- -20 °C on analyysitodistuksen säilytysehto ja riittää kylmäkuivatulle materiaalille koko ilmoitetun säilyvyysajan. -80 °C pidentää aikaa vielä lisää ja on tavallinen käytäntö laboratorioissa, joilla laite jo on, mutta ero näkyy vasta vuosissa eikä kuukausissa.
- Käykö kotipakastin peptidien säilytykseen?
- Lämpötila kyllä riittää, mutta tarkista, onko pakastin huurtumaton. Automaattiset sulatusjaksot lämmittävät tilan ajoittain nollan yläpuolelle, jolloin pulloa ei tosiasiassa pidetä analyysitodistuksen mukaisissa olosuhteissa. Käsin sulatettava laite on parempi valinta kaikelle, mitä säilytetään muutamaa viikkoa pidempään.
- Kakku on kutistunut tai painunut kasaan. Onko pullo pilalla?
- Ei välttämättä. Kakun ulkonäkö riippuu kylmäkuivausohjelmasta ja pullon käsittelystä, ja painunutkin kakku voi täyttää spesifikaationsa. Se kertoo kuitenkin, että pullo on jossain vaiheessa ollut lämmin tai kostea, joten dokumentoi se ennen käyttöä ja ota meihin yhteyttä, jos pullo saapui sellaisena.
Aiheeseen liittyvät artikkelit
- Peptidien säilyvyys ja stabiilius
Kuinka kauan kylmäkuivattu ja liuotettu peptidi säilyy, ja neljä asiaa jotka lyhentävät sitä: lämpötila, kosteus, valo ja hapettuminen. Säilytysarvot mukana.
- Kylmäkuivatun peptidin liuottaminen
Miten kylmäkuivattu peptidi liuotetaan bakteriostaattisella vedellä sitä vahingoittamatta: miksi neste valutetaan injektiopullon seinämää pitkin eikä ravisteta.
- Bakteriostaattinen vesi vs steriili vesi
Bakteriostaattinen vesi on steriiliä vettä ja 0,9 % bentsyylialkoholia, minkä ansiosta injektiopullon voi avata useasti. Milloin kumpikin on oikea valinta.